Le principe de l'assainissement est de partir des compétences des plantes dans lesquelles les méristèmes ont la capacité de régénérer des nouvelles plantes identiques au niveau génétique dans leurs caractéristiques phénotypiques. Dans le même temps, ces méristèmes sont généralement exempts de viroses. On part donc de cette caractéristique, on va donc prélever les apex sur des plantes mises en croissance dans un caisson qui permet de faire une pseudo-thérapie. Ces apex vont être traités dans des conditions de stérilité puis préparés, à savoir que l'on enlève les petites feuilles qui se trouvent autour pour délimiter cette zone. Celle-ci est ensuite coupée et mise sur un hypocotyle issu d'un pépin d'une variété le Viala. Cet hypocotyle facilite l'enracinement. Cet apex va ensuite se redévelopper et redonner une petite plante qui aura les caractéristiques phénotypiques du clone initial et qui sera, normalement, assainie et débarrassée du virus initialement présent. Ici, c'est la première étape du processus d'assainissement qui consiste à réaliser une pseudo-thermothérapie sur les boutures. Une fois qu'on a récupéré les sarments aoûtés, ils sont bouturés et les plantes sont mises en croissance dans ce caisson où la température est de 32 à 34°C. Cette température élevée limite la multiplication des virus dans la plante. Quand la plante est suffisamment développée, on récupère les apex à différents niveaux qui seront décortiqués en conditions stériles pour être microgreffés sur les hypocotyles. Cette technique est assez originale par rapport à celle couramment utilisée, qui est plus une technique de culture de méristèmes directement sur un milieu gélosé. Ici, le fait d'utiliser un support, à savoir l'hypocotyle qui va s'enraciner seul, nous permet d'éviter de mettre des hormones dans ce milieu de culture. Celles-ci ayant l'inconvénient de pouvoir induire une mutation, donc une modification du phénotype de la variété. Notre technique permet donc d'éviter l'utilisation d'hormones et les repiquages. Elle s'avère rapide à mettre en œuvre et garantit l'identité de la variété initialement utilisée. Au Domaine de l'Espiguette, notre technique est très efficace : nos taux de régénération ou de reprise s'élèvent en moyenne à 40 %. Si on travaille sur une vingtaine de méristèmes, on aura 40 % de reprise en moyenne, l'effet variétal étant bien sûr important. Parallèlement, les taux d'efficacité sont très bons : le pourcentage de plantes régénérées qui se trouvent exemptes des viroses initiales (les viroses générales étant ici ciblées, notamment celles de l'enroulement) s'élève à 100 % grâce à cette technique. La totalité des clones qui repousseront après la mise en culture — la totalité de ces plantules — sera exempte de ces viroses de l'enroulement. La technique est également très efficace sur la marbrure, le fleck. L'efficacité est légèrement moins bonne, mais néanmoins intéressante, sur le court-noué. Sur les deux principales viroses présentes en France, on obtient donc 80 % d'efficacité. Ainsi, 80 % des plantules obtenues suite à cet assainissement sont exemptes de ces viroses.

ImprimerImprimer